Поиск путей повышения продуктивности животных в сельском хозяйстве и, в частности, в ры-боводстве остается одним из основных направлений научных исследований. В современных условиях решение этого вопроса сопряжено с необходимостью отказа от кормовых антибиотиков ввиду развития антибиотикорезистентности [1]. На смену кормовым антибиотикам приходят пробиотические, пребиотические препараты [2–4], синбиотики [5]. В последние годы особый интерес представляют фитобиотики [6]. Применение препаратов растительного происхождения в рыбоводстве не слишком распространено. Лекарственные препараты, полученные из растительного сырья, несмотря на сравнительно низкую выраженность фармакологической активности, в иных случаях могут оказать значительно более сильный эффект, чем их синтетические аналоги. Это в полной мере относится к препаратам, полученным из коры дуба (Quercus cortex), которая в своем составе содержит различные биологически активные соединения с антиоксидантной активностью (дубильные вещества, танины, галловая и эллаговая кислоты и др.) [7–9]. Согласно имеющимся данным кора дуба показывает выраженную и стабильную анти-Quorum Sensing активность при отсутствии в ее составе очевидных антибактериальных веществ. В экстракте коры дуба были обнаружены 7 компонентов с анти-Quorum Sensing активностью [10, 11].Целью данного исследования явилось изучение влияния экстракта коры дуба в различных дозировках, пробиотического препарата «Соя-бифидум» и антибиотика «Ципрофлоксацина гидрохлорид» на гематологические показатели молоди карпа. Материалы и методы исследованияИсследования проведены на кафедре биотехнологии животного сырья и аквакультуры Оренбургского государственного университета в условиях аквариумного стенда, состоящего из 6 аквариумов (V = 300 л). Аквариумный стенд оснащен системой фильтрации и насыщения воды кислородом. Объектом исследований являлись годовики карпа, выращенные на предприятии ООО «Оренбургский осетр» (г. Оренбург). Для проведения исследования методом пар-аналогов сформированы 6 групп (n = 20) молоди карпа средней живой массой 37–38 г. По истечении подготовительного периода (7 сут) рыба переведена на условия основного учетного периода (35 сут), предполагавшего кормление контрольной группы основным рационом (ОР), I опытной группы – ОР совместно с экстрактом Quercus cortex в количестве 1 мг/кг от объема корма, II опытной группы – ОР совместно с экстрактом Quercus cortex в количестве 2 мг/кг от объема корма, III опытной группы – ОР совместно с экстрактом Quercus cortex в количестве 3 мг/кг от объема корма, IV опытной группы – ОР совместно с пробиотическим препаратом «Соя-бифидум» в дозировке0,7 мл/кг корма, V опытной группы – ОР совместно с антибиотиком «Ципрофлоксацина гидрохлорид» в составе препарата «Антибак 250» в дозировке 100 мг/кг корма.В качестве основного рациона был использован корм КРК-110-1 производства ОАО «Оренбургский комбикормовый завод» (г. Оренбург).Пробиотический препарат «Соя-бифидум» (свидетельство госрегистрации RU.77.99.11.003. Е.000449.01.12 от 13.01.12) производства ООО «НПФ “Экобиос”» (г. Оренбург) содержит не менее 109 клеток Bifidobacterium longum.В качестве антибиотика был использован препарат «Антибак 250», который в качестве действующего вещества содержит ципрофлоксацина гидрохлорид.В исследовании была использована смесь веществ, выделенных из экстракта Quercus cortex и синтезированных химическим путем, в том числе 4-гидрокси-3-метоксибензальдегида (ванилин), 4-пропил-1,3-бензолдиол (пропилрезорцин), 4-(3-гидрокси-1-пропенил)-2-метоксифенол (конифериловый спирт), 7-гидрокси-6-метокси-2Н-1-бензопиран-2-он (кумарин), 2Н-1-бензопиранон-2 (скополетин), 3, 4, 5-триметилгидросифенол (антиарол).Кормление подопытных карпов осуществлялось 3 раза в сутки полнорационным комбикормом в соответствии с существующими нормами. В ходе исследований суточную норму кормления определяли в количестве 3 % от массы рыб. С целью изучения гематологических параметров в начале и при завершении исследования проводился отбор крови согласно действующим методическим рекомендациям [12]. Определение гематологических показателей крови осуществлялось с использованием автоматического гематологического анализатора URIT-2900 Vet Plus (URIT Medical, Китай) в ЦКП «Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий Российской академии наук». Для работы на анализаторе использованы стандартные наборы реактивов.Статистический анализ проводили путем сравнения опытных групп с контрольной группой при использовании пакета программ Statistica 10.0 (Stat Soft Inc., США) и SPSS 19.0 программного обеспечения (IBM Corporation, США). Проверку соответствия опытных данных нормальному закону распределения проводили при помощи критерия согласия Колмогорова. Различия считались статистически достоверными при 𝑃 ≤ 0,05. Результаты исследования и их обсуждениеКровь является чувствительным и информативным индикатором состояния организма, быстро реагирующим на изменения экзогенных и эндогенных факторов. Морфологическиеи биохимические показатели крови могут служить маркером физиологического состояния организма рыб, характеризовать качество и количество питания, адаптивные способности рыбыи ее стрессоустойчивость [13].В ходе исследований нами были выявлены определенные изменения в составе кровигодовиков карпа (табл. 1).Таблица 1Морфологический состав крови годовиков карпаПоказательГруппаКонтрольIIIIIIIVVЭритроциты, 1012/л1,21 ± 0,011,09 ± 0,101,03 ± 0,0061,10 ± 0,011,20 ± 0,021,15 ± 0,01Гемоглобин, г/л120 ± 2,5109 ± 2,0 *111 ± 1,8112 ± 2,1121 ± 2,4104 ± 2,0***Гематокрит, %22,8 ± 1,2519,1 ± 0,517,2 ± 0,3 **16,0 ± 0,8**19,2 ± 1,117,3 ± 0,4 *Средняя концентрация гемоглобинав эритроците, г/л99,1 ± 4,6100,0 ± 3,5118,8 ± 5,0101,8 ± 4,2100,8 ± 3,990,4 ± 4,5Среднее содержаниегемоглобина в одномэритроците (СГЭ), пг526 ± 5,0570 ± 5,6 ***875 ± 6,0 ***700 ± 6,5***630 ± 5,5***601 ± 9,0***Средний объемэритроцитов, фл189,0 ± 4,0175,3 ± 3,6 *156,4 ± 3,0 **145,9 ± 3,5 ***160,3 ± 3,7 ***151,1 ± 5,5***Лейкоциты, 109/л120,7 ± 4,3110,4 ± 3,9109,3 ± 3,6109,4 ± 4,4136,0 ± 5,1*113,8 ± 4,0Число лимфоцитов, 109/л70,9 ± 4,597,9 ± 5,9 **99,5 ± 3,898,4 ± 5,0 **80,6 ± 4,879,5 ± 5,1Число моноцитов, 109/л8,1 ± 0,46,6 ± 0,5 **6,0 ± 0,2 *6,3 ± 0,4 **8,2 ± 0,57,4 ± 0,3Число гранулоцитов, 109/л5,1 ± 0,35,9 ± 0,44,8 ± 0,54,7 ± 0,44,5 ± 0,34,3 ± 0,4Тромбоциты, 109/л99 ± 4,571 ± 4,672 ± 4,778 ± 4,075 ± 3,781 ± 5,5Средний объемтромбоцитов, фл19,0 ± 0,419,2 ± 0,622,4 ± 0,821,6 ± 0,722,2 ± 1,021,8 ± 0,9* Р ≤ 0,05; ** Р ≤ 0,01; *** Р ≤ 0,001. В частности, зафиксировано снижение содержания гемоглобина в I опытной группе – на9 % (Р ≤ 0,05) – и в V группе – на 13 % (Р ≤ 0,001) – по сравнению с контролем.Гематокрит (от 16 до 68 %) и средний объем эритроцитов (от 7 до 29 %) во всех опытных группах были ниже контрольных значений. Содержание гемаглобина и средняя концентрация гемоглобина в эритроците во всех опытных группах показали значения, превышающие контрольную группу. Максимальные значения этих показателей наблюдались во II группе (СГЭ на 66 %, средняя концентрация гемоглобина в эритроците на 20 % выше по сравнению с контролем).Повышение уровня лейкоцитов по сравнению с контролем зафиксировано только в IV опытной группе – на 13 % (Р ≤ 0,05). Клетки белой крови карпа были представлены гранулоцитамии агранулоцитами. Основную массу агранулоцитов составляли лимфоциты (86,1–94,0 %).Самый низкий уровень моноцитов наблюдался во второй опытной группе (на 35 % меньше контрольной группы). Количество гранулоцитов во всех опытных группах (кроме I группы) было меньше контроля (в V группе на 19 % меньше контрольной группы). Пониженное содержание моноцитов и гранулоцитов, вероятно, объясняется напряжением иммунной системы в результате активизации обмена веществ в организме рыб.Для более полной характеристики общего состояния организма подопытных рыб было проведено биохимическое исследование сыворотки крови (табл. 2).  Таблица 2Биохимический состав сыворотки крови годовиков карпаПоказательГруппаКонтрольIIIIIIIVVГлюкоза, ммоль/л1,29 ± 0,25,42 ± 0,8 *4,37 ± 0,4*4,25 ± 0,5*3,98 ± 0,4 *2,32 ± 0,3 **Общий белок, г/л28,9 ± 2,833,3 ± 3,229,4 ± 3,626,7 ± 3,026,9 ± 3,526,4 ± 3,0Билирубин прямой, мкмоль/л0,40 ± 0,060,55 ± 0,060,50 ± 0,070,33 ± 0,050,29 ± 0,070,42 ± 0,05Билирубин общий, мкмоль/л1,60 ± 0,21,46 ± 0,11,44 ± 0,21,46 ± 0,31,60 ± 0,31,60 ± 0,2Холестерин, ммоль/л5,87 ± 0,76,49 ± 0,44,28 ± 0,74,56 ± 0,64,82 ± 0,54,40 ± 0,5Альбумин, г/л11 ± 1,113 ± 1,511 ± 1,311 ± 1,211 ± 1,411 ± 1,5Триглицериды, ммоль/л3,69 ± 0,43,12 ± 0,52,87 ± 0,42,90 ± 0,63,10 ± 0,73,05 ± 0,5Креатинин, мкмоль/л27,4 ± 3,322,6 ± 2,419,1 ± 2,321,9 ± 2,619,8 ± 2,520,5 ± 2,2Мочевина, ммоль/л1,7 ± 0,32,0 ± 0,32,1 ± 0,51,7 ± 0,42,4 ± 0,31,8 ± 0,2Фосфор, ммоль/л8,42 ± 0,97,12 ± 1,16,40 ± 0,76,30 ± 1,07,00 ± 1,26,00 ± 0,8Железо, мкмоль/л16,1 ± 2,147,5 ± 6,5 **12,8 ± 1,46,3 ± 0,6 **9,9 ± 2,49,9 ± 2,6* Р ≤ 0,001; ** Р ≤ 0,01. Изучение биохимических показателей позволяет получить дополнительные данные о физиологическом состоянии карпа. В наших исследованиях зафиксировано повышение содержания глюкозы в группах, получавших экстракт Quercus cortex: в I опытной группе в 4,2 (Р ≤ 0,001), во II в 3,4 (Р ≤ 0,001), в III группе в 3,3 (Р ≤ 0,001) раза по сравнению с контролем. Повышение содержания глюкозы свидетельствует об активных обменных процессах в организме рыб, повышении стрессоустойчивости [14]. Содержание креатинина во всех опытных группах было ниже по сравнению с контрольной группой. Во второй группе, получавшей экстракт Quercus cortex в дозировке 2 мл/кг корма, этот показатель имел минимальные значения (на 30 % меньше контроля).Уровень мочевины в группах, получавших экстракт Quercus cortex в дозировке 1 и 2 мл/кг корма, а также в группах, получавших пробиотический препарат и антибиотик, оказался выше контроля на 18, 42, 42 и 6 % соответственно. Однако данные различия оказались статистически недостоверными. Содержание железа в крови карпа только в I опытной группе было выше контроля (в 3 раза). Содержание фосфора во всех опытных группах оказалось несколько ниже контроля.Повышение активности аланинаминотрансферазы (АЛТ) наблюдалось во всех опытных группах, наиболее высокий показатель этого фермента был зафиксирован в IV опытной группес достоверным превышением контроля на 48 %. Активность аспартатаминотрансферазы (АСТ) была ниже контроля только в группе, получавшей антибиотик (на 6 %). Активность фермента лактатдегидрогеназы (ЛДГ) во всех опытных группах превысила контроль, максимальное повышение (на 67 %) отмечено в IV опытной группе.Щелочная фосфатаза была ниже контроля во всех опытных группах. Минимальные значения – в IV опытной группе – на 37 % меньше контроля. Показатели p-амилазы в IV группе превосходили контрольную в 2,6 раза, в V – в 1,5 раза. Во II же группе p-амилаза была ниже контрольной на 44 %, а в III – в 1,9 раза (табл. 3). Таблица 3Активность ферментов в кровиПоказательГруппаКонтрольIIIIIIIVVАЛТ, Ед/л96,7 ± 3,6102,5 ± 4,5111,7 ± 6,5112,6 ± 5,0 *143,2 ± 7,5 **117,0 ± 6,0 *АСТ, Ед/л316,4 ± 12,7420,0 ± 11,0 **443,3 ± 6,6413,7 ± 10,3 **477,0 ± 13,1 **298,5 ± 8,0ЛДГ, Ед/л1 599 ± 172 089 ± 14 **2 159 ± 19 **1 939 ± 15 **2671 ± 20 **2 440 ± 22 **Гамма-глутамилтрансфераза (г-ГТ), Ед/л2 ± 0,31 ± 0,21 ± 0,22 ± 0,32 ± 0,41 ± 0,2Щелочная фосфатаза, Ед/л97 ± 7,576 ± 6,572 ± 5,075 ± 6,071 ± 5,6 *77 ± 7,0p-амилаза, Ед/л55,4 ± 6,156,4 ± 12,5 **38,5 ± 7,529,0 ± 4,2**142,6 ± 6,8 **84,7 ± 6,0 ** Р ≤ 0,05; ** Р ≤ 0,001.Повышение уровня активности некоторых ферментов (АСТ, ЛДГ) во всех опытных группах может быть связано с нарушением липидного обмена, происходящего в ряде случаев во время интенсивного роста и развития организма. Уменьшение активности щелочной фосфатазы и значительное повышение активности амилазы свидетельствует о положительном влиянии кормов на физиологический статус рыб, более активно протекающих обменных процессах [15]. ЗаключениеАнализируя полученные данные, можно сделать следующие выводы. Добавление в корм молоди карпа экстракта коры дуба (Quercus cortex) в разных дозировках, а также пробиотического препарата «Соя-бифидум» и антибиотика «Ципрофлоксацина гидрохлорид» не вызвало значительных отклонений гематологических показателей от физиологической нормы. Введение в рацион пробиотического препарата «Соя-бифидум» способствовало повышению гемоглобина, в то время как на содержание гемоглобина и среднюю концентрацию гемоглобина в эритроците повлияло включение в рацион антибиотического препарата.Наблюдалось высокое содержание глюкозы во всех опытных группах по сравнению с контролем.Морфологические и биохимические показатели крови молоди карпа в опытных группах свидетельствуют об активных процессах обмена веществ, усвоения корма, отсутствии воспалительных процессов.Повышение уровня активности некоторых ферментов (АСТ, ЛДГ) во всех опытных группах может быть связано с нарушением липидного обмена, происходящего в ряде случаев во время интенсивного роста и развития организма. Уменьшение активности щелочной фосфатазы и значительное повышение активности амилазы свидетельствует о положительном влиянии кормов на физиологический статус рыб, более активно протекающих обменных процессах.Таким образом, включение в рацион молоди карпа экстракта Quercus cortex положительно повлияло на иммунный статус, обменные процессы, гемопоэз и усвояемость кормов, что может позволить отказаться от применения антибиотиков при выращивании рыб. На наш взгляд, необходимо проведение дополнительных исследований совместного использования экстракта Quercus cortex и пробиотических препаратов в кормлении рыб.